Anales de la RANM

43 A N A L E S R A N M R E V I S T A F U N D A D A E N 1 8 7 9 S U P L E M E N T O I SIMPOSIO · JÓVENES INVESTIGADORES Libro de Abstracts An RANM. 2021;138(03).supl01: 43 - 54 and carboplatin). In recent years, our group has developed different in vitro models of resistance to chemotherapy, both intrinsic and acquired, which have allowed us, on the one hand, to identify new druggable targets in TNBC and, on the other hand, to evaluate the anti-tumor action of compounds directed against these targets. Using fresh peritumoral adipose tissue from TNBC patients (CEIm 08/2017, GAI Albacete) and tumor cells of this subtype (MDA-MB-231, BT549, HS578T and HCC3153), we have designed intrinsic resistance models that mimic the tumor microenvi- ronment in vitro . 3D models (tumorspheres) were also generated to better recapitulate the charac- teristics of the chemo-resistant tumor stem cell population present in tumors. For the develop- ment of acquired resistance models, tumor lines were exposed to increasing concentrations of the chemotherapeutic (IC30-IC70) using a periodic pulsing strategy. The models were characterized by qPCR using a panel of markers. The impact of the drugs on tumor cells was evaluated in vitro by MTT (proliferation), clonogenic (tumor initiation) and matrigel (invasion) assays, and by flow cytometry (cell death), demonstrating the usefulness of these models to evaluate response to chemotherapy. To evaluate the in vivo effect, orthotopic models were used in immunosuppressed mice (BALB-nu). Our results suggest several interesting therapeutic options. On the one hand, we have identified a panel of markers that could be useful for stratifying TNBC patients, acting as a biomarker of patient response and prognosis. On the other hand, we have identi- fied new therapeutic targets whose pharmacolog- ical inhibition reverses or prevents resistance to cisplatin-based chemotherapy, which may have therapeutic relevance for those patients being treated with platinum derivatives. Introducción: El cáncer de mama triple negativo (TNBC) es el subtipo de cáncer de mama que más heterogeneidad presenta debido en gran parte a una presencia elevada de células madre tumorales (CSC, del inglés Cancer Stem Cells ). Además,este subtipo tumoral no presenta dianas terapéu- ticas específicas, lo que restringe su tratamiento a radioterapia y quimioterapia tradicional. Estos tratamientos afectan en gran medida a células tumorales normales, pero las CSC suelen presentar resistencia intrínseca a estos tratamientos. Por ese motivo, esta población celular se ve aumentada conforme los tumores adquieren resistencia al tratamiento. Las proteínas BET son efectores epigenéticos conocidos por controlar la expresión de los marcadores de CSC y, por lo tanto, los inhibidores de BET (BETi), como JQ1, podrían ser una alterna- tiva de tratamiento que controlase la población de CSC dentro del tumor y ayudase a revertir la quimiorresistencia. Como ocurre en las líneas parentales según datos publicados anteriormente en el laboratorio, donde JQ1 consigue reducir estos marcadores y por lo tanto, esta población se ve reducida. Materiales y métodos : Para este trabajo, s1e generaron modelos celulares de resistencia a quimioterapia tradicional en células de TNBC. A través de estudios de qPCR se analizó la expresión de un panel de marcadores de CSC en las células generadas comparándolas con las líneas sensibles y se evaluó el impacto de JQ1 sobre dichos marcadores. También se realizaron ensayos de proliferación MTT, de progresión tumoral y de iniciación tumoral, a través de la formación de colonias, en células resistentes en respuesta a este BETi. La respuesta a este inhibidor sobre la apoptosis de la población de células resistentes fue evaluada mediante el análisis de unión de Anexina V por citometría de flujo. Resultados: Las células TNBC con resistencia adquirida a la quimioterapia se observó un aumento de la expresión en marcadores de CSC. Al tratar las células con JQ1 se consiguió reducir la expresión de estos marcadores, a pesar encontrarse aumentados en el modelo resistente. Además, estos fármacos ralentizaron la proliferación celular y obstaculizaron la progresión tumoral de las células resistentes a la quimioterapia, evitando también la formación de colonias, lo que se traduce en una reducción de la recaída de estos tumores tras el tratamiento. La evaluación de la apoptosis confirmó que los BETi provocaron muerte celular en estos modelos. Todos estos resultados han sido estudiados en comparación con la línea sensible, donde no se puede observar una reducción de estas propiedades estudiadas. Conclusiones : Los inhibidores de BET disminuyen los marcadores de CSCs en el TNBC, lo cual lo consigue mejor en el modelo resistente, a pesar de su sobreexpresión, consigue reducir además las propiedades de las CSC (proliferación, progresión e iniciación tumoral). Por ello, podría USE OF BET PROTEIN INHIBITORS TO CONTROL ACQUIRED RESISTANCE IN MAM- MARY TUMORS David Tebar-García 1 , Raquel López-Rosa 1 , Mª del Mar Noblejas-Lopez 1,2 , Miriam Nuncia-Cantarero1, Cristina Nieto-Jimenez 3 , Miguel Burgos 1,2 , Alberto Ocaña 3 , Eva M. Galan-Moya 1,2,4* 1 Translational Oncology Laboratory, Centro Regional de In- vestigaciones Biomédicas (CRIB), Universidad de Castilla La Mancha, Albacete, Spain. 2 Translational Research Unit, University Hospital, Albacete, Spain. 3 Experimental Therapeutics Unit, Medical Oncology Depart- ment, Hospital Clínico San Carlos (HCSC), Instituto de Investi- gación Sanitaria (IdISSC) and CIBERONC, Madrid, Spain. 4 Nursery faculty, Castilla-La Mancha University (UCLM), Al- bacete, Spain. USO DE INHIBIDORES DE PROTEÍNAS BET PARA CONTROLAR LA RESISTENCIA ADQUIRI- DA EN TUMORES MAMARIOS