Anales de la RANM

23 A N A L E S R A N M R E V I S T A F U N D A D A E N 1 8 7 9 S U P L E M E N T O II SIMPOSIO · JÓVENES INVESTIGADORES Libro de Abstracts An RANM. 2023;140(02).supl01: 23 - 34 de la EA no es del todo comprendida, se cree que varios eventos degenerativos, incluyendo el estrés oxidativo (EO), la neuroinflamación, la disfun- ción mitocondrial, la dishomeostasis de calcio y la desregulación de la autofagia, contribuyen a la enfermedad. Estos procesos están estrecha- mente interconectados, lo que destaca la natura- leza multifactorial de la EA. Como resultado, los ligandos dirigidos a múltiples surgen como una estrategia prometedora para su tratamiento. Dos posibles dianas para estas moléculas son la activación del factor de transcripción NF-E2 p45-related factor 2 (NRF2), que desempeña un papel clave en la defensa celular contra el EO, así como en la regulación de los procesos autofágicos, la inflamación y la proteostasis; y la modulación del receptor nicotínico de acetilcolina α7 (α7-nAChR), relacionada con la disminución de la producción de péptido β-amiloide, la reducción de la hiperfos- forilación de tau, la disminución de la neuroin- flamación y una menor pérdida de memoria a corto plazo en modelos in vivo de EA. En este estudio, hemos sintetizado y evaluado una nueva familia de compuestos inductores de NRF2 y moduladores selectivos del α7-nAChR. Estos compuestos ejercen un efecto neuroprotector en modelos in vitro de estrés oxidativo e hiperfosfori- lación de tau. Sin embargo, los compuestos evaluados fueron identificados como sustratos de los sistemas de efluxión de la barrera hematoencefálica (BHE) en estudios de distribución cerebral in vivo . En base a estos resultados, se seleccionó un compuesto hit de esta familia para su modifi- cación con el fin de aumentar su potencia como modulador del α7-nAChR y reducir su recono- cimiento por los sistemas de efluxión de la BHE. Mediante modelado de homología, docking y simulaciones de dinámica molecular, hemos predicho el modo de unión del compuesto hit al α7-nAChR. Mediante este estudio, se identificaron regiones del compuesto que no son participan en la unión al receptor y, por tanto, son susceptibles de modificación. Usando un programa de optimi- zación paralela basado en cribado virtual de fragmentos y el empleo del algoritmo CNS-MPO, se obtuvieron dos nuevas familias de compuestos con mejores propiedades teóricas. Los nuevos derivados mantienen su actividad frente ambas dianas y presentan un mejor perfil farmacológico, incluyendo un mayor efecto neuroprotector contra el estrés oxidativo y la hiperfosforilación de tau, así como propiedades antiinflamatorias in vitro . En base a estos resultados, el compuesto B4 fue seleccionado para su evaluación in vivo utilizando dos líneas de pez zebra ( Danio rerio ) que expresan la proteína tau humana con las mutaciones P301L y A152T, que promueven la hiperfosforilación de tau y producen una alteración a nivel compor- tamental. El tratamiento con B4 a una concen- tración de 3 µM fue capaz de rescatar parcialmente las alteraciones comportamentales características de ambos modelos. Estos resultados sugieren que el compuesto B4 tiene un potencial prometedor como agente terapéutico para el tratamiento de taupatías como la EA. AGONISMO SIGMA-1 Y DOLOR: PAPEL DE LAS CÉLULAS INMUNITARIAS Y DE LAS NEURONAS TRPV1+ Miguel Ángel Huerta 1 , M Carmen Ruiz-Cantero 1 , Miguel Á. Tejada 1 , Eduardo Fernández-Segura 2 , Francisco J. Cañizares 2 , José M Baeyens 1 , Enrique J Cobos 1 1. Departamento de Farmacología 1 y Departamento de Histología 2 , Centro de Investigación Biomédica e Insti- tuto de Neurociencias, Universidad Granada e Instituto de Investigación Biosanitaria ibs.GRANADA. El receptor sigma-1 es una proteína neuromo- duladora. Tanto los agonistas como los antago- nistas sigma-1 tienen posibilidades terapéuticas. El dextrometorfano es un agonista no selectivo sigma-1 usado como antitusígeno. Hay otros agonistas sigma-1 más selectivos, como el PRE-084, el cual se usa en experimentación preclínica, y la pridopidina, la cual está en desarrollo clínico para el tratamiento de la enfermedad de Huntington. Por otro lado, los antagonistas sigma-1 se están desarrollando como analgésicos. Nuestros estudios indican que el receptor sigma-1 es capaz de unirse al TRPV1, y que los antagonistas sigma-1 disminuyen la sensibilización de los nociceptores TRPV1+. Sin embargo, el efecto de los agonistas sigma-1 en el dolor no se ha estudiado en profundidad. La administración subcutánea de dextrometorfano, PRE-084 o pridopidina, en ratones de genotipo salvaje, incrementó el efecto de la administración intraplantar de una dosis baja de PGE2 (0,125 nmol), carente de actividad hiperalgésica per se . Puesto que la PGE2 es un mediador inflamatorio, usamos un modelo más próximo a una situación clínica real, y estudiamos el efecto de los agonistas sigma-1 tras una lesión quirúrgica de la superficie plantar. La cirugía indujo una disminución del peso apoyado en la pata (medido mediante un Dynamic Weight Bearing ) en el periodo postoperatorio inmediato, a las 3,5h, que se recuperó por completo a las 24h tras la cirugía. Pese a esta recuperación aparente, los animales mostraron un edema en la dermis y el tejido subcutáneo (determinado mediante tinciones de hematoxilina-eosina), y una infiltra- ción neutrofílica (determinada mediante citome- tría de flujo). En esta circunstancia, la adminis- tración subcutánea de los agonistas sigma-1 hizo que el peso apoyado por la pata lesionada disminu- yera como si el animal volviera a estar en el periodo postoperatorio inmediato. Se sabe que las células inmunitarias producen PGE2 durante la inflama- ción, y de hecho, el efecto pronociceptivo del agonismo sigma-1 desapareció completamente al bloquear la infiltración neutrofílica mediante la administración de un anticuerpo frente al Ly6G, una molécula importante para la adhesión de este tipo de células inmunitarias. Además, encontramos que el efecto pronocicep- tivo de los agonistas sigma-1, tanto en la hiperal- gesia inducida por la administración de PGE2 como tras la incisión plantar, fue abolido por la elimina-