Anales de la RANM

16 S U P L E M E N T O III SIMPOSIO · JÓVENES INVESTIGADORES Libro de Abstracts An RANM. 2024;141(02).supl01: 16 - 40 Cristina Molina López 1 , Laura Hurtado-Navarro 1 , Pablo Pelegrín 1,2 1. Instituto Murciano de Investigación Biosanitaria (IMIB), Murcia 2. Departamento de Bioquímica y Biología Molecular B e Inmunología, Facultad de Medicina, Universidad de Murcia, Murcia Variantes monoalélicas de ganancia de función en el gen NLRP3 desencadenan los Síndromes Periódicos Asociados a la Criopirina (CAPS), una afección autoinflamatoria que comienza de forma temprana en la vida y que cursa con brotes inflama- torios asociados a una exacerbada producción de la citocina pro-inflamatoria IL-1beta. Los síndromes CAPS se caracterizan por presentar episodios recurrentes de fiebre, erupción cutánea, conjunti- vitis e inflamación articular, y se tratan satisfacto- riamente mediante el uso de bloqueantes de IL-1. Existen distintos fenotipos clínicos de gravedad en CAPS, que se clasifican en el síndrome autoin- flamatorio familiar inducido por frío (FCAS), en el síndrome de Muckle-Wells (MWS), y en la enfermedad inflamatoria multisistémica de inicio neonatal/síndrome neurológico cutáneo articular infantil crónico (NOMID/CINCA). La afección FCAS es la más leve, el NOMID/CINCA el fenotipo más grave, y el MWS el intermedio. Las variantes de NLRP3 asociadas a CAPS presentan una activación constitutiva formando de forma espontánea inflama- somas, induciendo una elevada producción de IL-1b tras el cebado celular. En este trabajo, se utilizaron macrófagos modificados genéticamente que expresaban diferentes variantes de NLRP3 asociadas a CAPS para evaluar la función de NLRP3 sobre el metabolismo celular. Empleando estos macrófagos hemos descubierto que las variantes de NLRP3 asociadas a CAPS modifican el perfil metaboló- mico de la célula, induciendo cambios en metabo- litos relacionados con los nucleótidos, los lípidos o los amino ácidos. Todos estos cambios se revirtieron cuando las células se trataron con MCC950, un inhibidor específico de NLRP3. Además, la expresión de NLRP3 con variantes asociadas a síndromes CAPS, pero no NLRP3 silvestre, redujeron la expresión de genes relacionados con la glucólisis. A nivel funcional, la expresión de NLRP3 con mutaciones ganancia de función redujo tanto la glucolisis basal como la glucólisis compesnatoria de los macrófagos, siendo este efecto revertido por el uso de MCC950. La expresión de NLRP3 con variantes asociadas a síndromes CAPS también resultó en una disminu- ción de la producción de piruvato y lactato, así como en la producción de ATP glicolítico. No obstante, la expresión de NLRP3 con variantes no afectó signifi- cativamente el metabolismo mitocondrial. El bloqueo de la glicolisis por NLRP3 limitó la producción basal de IL-1b, ya que el tratamiento con piruvato para compensar el defecto de la glicolisis aumentó la producción de IL-1b pero no afectó la producción de IL-18. Estos resultados demuestran que las variantes de NLRP3 asociadas a CAPS inducen una produc- ción basal de IL-18, pero no de IL-1b, aumentando la expresión de genes relacionados con la respuesta inflamatoria y de respuesta a virus, sin causar brotes inflamatorios. La inducción de la glicolisis con el cebado celular aumenta la producción de IL-1b, sugiriendo que los brotes inflamatorios en CAPS pueden estar regulados por el metabolismo celular. capaz de revertir el efecto del S1RA. Nuestros datos sugieren que el antagonismo sigma-1 incrementa la analgesia opioide de las células inmunitarias para inducir un efecto antialodínico. Sin embargo, el S1RA no fue capaz de revertir el dolor en reposo o el dolor producido por el movimiento tras la cirugía. También evaluamos la administración conjunta de S1RA y morfina, y encontramos un marcado efecto sinérgico, revirtiendo completamente la alodinia mecánica, el dolor en reposo y el dolor inducido por el movimiento. En conclusión, nuestros hallazgos sugieren que el antagonismo del receptor sigma-1 podría ser una valiosa herramienta terapéutica como potenciador de la analgesia opioide (proveniente de las células inmunitarias, así como de fármacos opioides) en el dolor postoperatorio. Agradecimientos AgenciaEstataldeInvestigación(10.13039/501100011033 PID2020-116709RB-I00, CNS2022-13510, PRE2018- 086824 , Fundación Séneca (21897/PI/22, 21214/ FPI/19), Instituto Salud Carlos III (AC22/ 00009).    Enrique J Cobos 1 1. Departamento de Farmacología, Centro de Investi- gación Biomédica e Instituto de Neurociencias, Univer- sidad Granada e Instituto de Investigación Biosanitaria ibs.GRANADA. La mayoría de los pacientes postquirúrgicos sufren dolor moderado o intenso, a pesar del tratamiento analgésico. Por tanto, es intere- sante estudiar el dolor postoperatorio y profun- dizar en sus mecanismos de producción. Como modelo de dolor postoperatorio, hemos realizado una laparotomía en el ratón, en la que incisión se ha producido de manera perpendicular a la línea alba. Hemos estudiado la hipersensibilidad cutánea mediante la medición del umbral de von Frey, el dolor en reposo mediante el análisis de las expresiones faciales de dolor (usando un algoritmo de inteligencia artificial), y el dolor inducido por el movimiento mediante el análisis de la actividad exploratoria. Realizamos todos los ensayos dentro del periodo postoperatorio inmediato, a las 3.5h tras la cirugía. Como parte de la caracterización farmacológica del modelo, usamos la administración del opioide morfina y del antiinflamatorio no esteroideo (AINE) ibuprofeno. Mientras que la morfina I I I S IMPOS IO · JÓVENES INVEST IGADORES L i bro de abs t rac t s