Anales de la RANM

28 A N A L E S R A N M R E V I S T A F U N D A D A E N 1 8 7 9 S U P L E M E N T O III SIMPOSIO · JÓVENES INVESTIGADORES Libro de Abstracts An RANM. 2024;141(02).supl01: 28 - 40 €  ‚ A ⠐ Juana Andreo-Lopez 1 , Miriam Bettinetti-Luque 1 , Mario Morales-Cabello 1 , Ivan Fatuarte-Juli 1 , Cynthia Campos-Moreno 1 , Juan Antonio Garcia-Leon 1,2 , Anto- nia Gutierrez 1,2 y David Baglietto-Vargas 1,2 1. Departamento de Biología Celular, Genética y Fisiología, Instituto de Investigaciones Biomédicas de Málaga- Plataforma BIONAND, Facultad de Ciencias, Universidad de Málaga, 29071 Málaga, España. 2. CIBER de Enfermedades Neurodegenerativas, Instituto de Salud Carlos III, España. La enfermedad de Alzheimer (EA) es una compleja patología neurodegenerativa responsable de la mayoría de los casos de demencia en mayores de 65 años. Se trata de una proteinopatía doble que cursa con acumulación de agregados proteicos neurotóxicos, por un lado, agregados de proteína tau hiperfosforilada intraneuronales formando ovillos neurofibrilares, y también agregados extracelulares de proteína β-amiloide (Aβ) que se depositan en las denominadas placas seniles. La formación de estos depósitos insolubles proteicos y el mecanismo por el que se propagan los distintos agregados proteicos, aún permanecen desconocidos. En relación a esto, nuevas evidencias científicas sugieren que ambos péptidos con plegamiento alternativo tienen una alta capacidad de propagarse por el parénquima cerebral y afectar a proteínas nativas para que éstas adquieran una conformación aberrante, favore- ciendo la progresión de la enfermedad. Gracias a estudios previos, se conoce que existen cuatro factores principales capaces de modular el proceso de agregación del Aβ: el origen de la semilla de Aβ, el tiempo de incubación con la misma, el huésped en el que se inyecta y la ruta de administración. El objetivo planteado en este estudio ha sido avanzar en el conocimiento en los procesos de agregación, y determinar cómo estos factores influyen en ellos. En este estudio nos hemos centrado en la propaga- ción diferencial que ocurre en la patología amiloide y tau de los animales de la línea transgénica 3xTg-AD inyectados intracranealmente con homogenados de cerebro de distinto origen. En concreto, se tratan de inóculos que contienen semillas de Aβ y tau pertenecientes a un paciente humano de Alzheimer y a un modelo murino de la EA de edad avanzada (3xTg-AD de 25 meses de edad). Tras el análisis de los cerebros inyectados, hemos observado que la patología adquiere un patrón diferente según el inóculo, siendo posible que distintos tipos de semilla tengan un impacto diferencial en el progreso de la EA, resaltando la importancia de descubrir la heterogeneidad que subyace en esta enfermedad. Además, hemos visto que dicho efecto viene acompañado de cambios neuroinflamatorios en el cerebro, teniendo la microglía un papel muy importante en el evento de agregación y formación de placas, algo que se ha demostrado también en investigaciones recientes. Concretamente, se ha observado que las semillas de origen murino tienen un efecto negativo sobre la microglía, a diferencia de las de humano, con una disminución del número de células microgliales en el parénquima cerebral y su asociación a las placas amiloideas, lo que resulta en un aumento de neurítas distróficas que rodean a las mismas. Para determinar el agente causante de este efecto sobre la microglía, se han realizado cultivos celulares en la línea microglial murina BV-2 con extractos con las semillas de Aβ o tau. Los resultados han revelado que ambos tipos de agregados proteicos impactan sobre el compor- tamiento de la microglía. En conjunto, todos los resultados obtenidos han vuelto a resaltar que el tipo de semilla es capaz de determinar el desarrollo de la neuropatología de la EA. Además, según la hipótesis de la cascada amiloide, el péptido Aβ es capaz de agregar y comenzar la formación de depósitos insolubles hasta 20 años antes del inicio de la sintomatología clínica. Por tanto, un mayor conocimiento y caracterización de la propaga- ción de la patología de la EA y los péptidos Aβ y tau, puede resultar de gran valor para el diseño de estrategias terapéuticas efectivas en la EA. microscopía electrónica muestran que la estimu- lación neuronal produce una reducción en el número, densidad y distancia a la membrana de las vesículas de núcleo denso en neuronas hipota- lámicas. En paralelo, experimentos de inmuno- histoquímica indicaron la presencia de proteínas SNARE no clásicas, como SNAP-23, SNAP-47 y Syt-4 en el soma y las dendritas de las neuronas oxitocinérgicas, sugiriendo un potencial papel en la dinámica y liberación de las vesículas de OT. Experimentos de secreción y chasing vesicular indicaron una estrecha relación entre OT y SNAP-47, que quedó demostrada mediante la realización de infecciones con un knockdown específico para eliminar la expresión endógena de SNAP-47, que produjo una reducción significativa en el número de vesiculas de OT, tanto en condiciones basales como en respuesta a la estimulación neuronal. Nuestros resultados indican que la OT presenta una dinámica diferente a los neurotransmisores clásicos, y que su liberación parece depender de proteínas SNARE no canónicas, como SNAP-47. Nuestro trabajo supone un primer paso para comprender la regulación del circuito de OT en el cerebro, lo que permitirá estudiar e identificar alteraciones asociadas con trastornos sociales como el autismo. Agradecimientos Este trabajo ha sido financiado por el Ministerio de Ciencia e Innovación (proyecto PID2020 – 113878RB- I00), la Fundación Alicia Koplowitz (proyecto OXI-DRIVE), y la Fundación Tatiana Guzmán el Bueno (proyecto OXITO-CURE), la Fundación ICAR (proyecto AgingSocial). BAE ha recibido un contrato FPI PRE2018-083812.