Anales de la RANM

30 A N A L E S R A N M R E V I S T A F U N D A D A E N 1 8 7 9 S U P L E M E N T O III SIMPOSIO · JÓVENES INVESTIGADORES Libro de Abstracts An RANM. 2024;141(02).supl01: 30 - 40    Rebeca París-Ogáyar 1,2 , Carmen Perez de la Lastra 1 , Oliva M.A 2 , J. Fernando Díaz 2 , Valle Palomo 1,3 1. IMDEA Nanociencia. Faraday 9, 28049 Madrid, Spain. 2. Centro de Investigaciones Biológicas Margarita Salas. Consejo Superior de Investigaciones Científicas. Ramiro de Maeztu 9, 28040 Madrid, Spain. 3. Centro de Investigación Biomédica en Red de Enferme- dades Neurodegenerativas (CIBERNED), Instituto de Salud Carlos III, 28031 Madrid, Spain. El transporte axonal deficiente causado por la altera- ción de la dinámica de los microtúbulos (MT) es una característica común de muchas enfermedades neurodegenerativas, incluidas las tauopatías como la enfermedad de Alzheimer (1). En los trastornos mencionados, el progreso de los motores celulares se ve obstaculizado por agregados de proteínas que probablemente contribuyen a la pérdida de función que da lugar a un tráfico axonal aberrante. Nuestro trabajo se centra en el desarrollo y evaluación de sondas peptídicas que se unen específicamente a proteínas motoras, kinesina I y dineína citosó- lica, como herramienta para evaluar potenciales fármacos neuroprotectores, incluyendo fármacos dirigidos contra el citoesqueleto (2, 3). Para ello, hemos diseñado sondas específicas para monitorizar el movimiento de los motores celulares mencio- nados en células vivas basadas en péptidos marcados fluorescentemente utilizando Quantum Dots y Cy5 como fluoróforos principales. También se han explorado los mecanismos de entrada en la célula para alcanzar el citosol con el fin de determinar la técnica de permeabilidad intracelular más eficiente. de α-sinucleína. El estrés oxidativo es un factor notablemente significativo en la progresión de la enfermedad, causando la interrupción del procesamiento de proteínas, la neuroinflamación y la disfunción mitocondrial. Estos problemas aumentan aún más el estrés oxidativo, creando un bucle patológico que acelera la neurodegenera- ción. El factor de transcripción NRF2 regula una amplia gama de funciones fisiológicas, lo que lo convierte en una diana atractiva para nuevos fármacos dirigidos a enfermedades crónicas caracteri- zadas por complejas redes patológicas. En este contexto, hemos desarrollado una nueva familia de inductores de NRF2 con actividades complemen- tarias para el tratamiento de la EP. Estos nuevos compuestos están diseñados para inhibir selecti- vamente la monoamino oxidasa B (MAO-B). Esta enzima juega un papel crucial en el control del estrés oxidativo relacionado con el metabolismo de la dopamina, de hecho, los inhibidores de MAO-B se han utilizado durante mucho tiempo en entornos clínicos para tratar los síntomas de la EP. Basándonos en hallazgos previos, iniciamos un programa de optimización hit-to-lead para mejorar la potencia de inhibición de MAO-B, reducir la toxicidad celular y mejorar las propie- dades de los nuevos compuestos, como la vida media y la permeabilidad de la barrera hematoen- cefálica. Para lograr este objetivo, se estableció una nueva quimioteca compuesta por casi 500 compuestos, la cual fue sometida a un exhaus- tivo proceso de cribado virtual. Tras analizar los resultados obtenidos, identificamos una familia de 30 compuestos, los cuales fueron sintetizados y sometidos a una evaluación farmacológica exhaus- tiva. Estos nuevos compuestos exhibieron mejoras significativas, incluyendo una mayor potencia en la inducción de NRF2, mayor selectividad hacia MAO-B y una mejor capacidad de penetración en el sistema nervioso central mediante difusión pasiva. Además, demostraron una protección neuronal superior, menor toxicidad celular y conservaron propiedades antioxidantes y anti-inflamatorias complementarias entre sí. Por último, mostraron un perfil farmacocinético favorable y efecti- vidad en un modelo de EP in vivo. En conclusión, nuestros datos indican que los nuevos compuestos multidiana desarrollados poseen actividades farmacológicas prometedoras, así como un perfil farmacocinético favorable, posicionándolos como potenciales candidatos para ser estudiados en modelos in vivo de EP. Agradecimientos Agradecemos la financiación recibida del Ministerio de Ciencia e Innovación (Ref.: PID2021-123481OB-I00), Comunidad de Madrid y fondos estructurales de la UE (grant P2022/ BMD-7230-CAM-22) y la acción europea COST Action CA20121: BenBedPhar. Figura 1. Células SHSY5Y y sondas peptídicas uorescentes