Anales de la RANM

152 A N A L E S R A N M R E V I S T A F U N D A D A E N 1 8 7 9 SENESCENCIA DE LINFOCITOS T Delgado Pulido S, et al. An RANM. 2022;139(02): 150 - 155 La hipótesis de nuestro laboratorio es que el declive de la función del sistema inmune con la edad no solo nos hace mucho más vulnerables a las infecciones y al cáncer, sino que, además, aumenta el riesgo de padecer patologías propias del enveje- cimiento como enfermedades cardiovasculares, neurodegenerativas y metabólicas. Para demostrar nuestra hipótesis, hemos generado un modelo de ratón cuyos linfocitos T, CD4 + y CD8 + , envejecen de forma prematura debido a una disfunción mitocondrial. Las mitocondrias son los orgánulos responsables de generar energía en forma de ATP mediante el proceso bioquímico de fosforilación oxidativa que recae en la correcta función de 4 complejos multiproteicos (complejos I al IV) que conforman la cadena de transporte de electrones y generan un gradiente electroquímico empleado por la ATP sintasa (complejo V) para la síntesis de ATP. Las proteínas que forman parte de estos complejos están codificadas tanto en el ADN nuclear como en el ADN mitocondrial (ADNmt) (7). A diferencia del ADN nuclear, que cuenta con múltiples mecanismos de reparación y correc- ción de errores durante su replicación, el ADNmt apenas dispone de sistemas de protección debido a su origen procariota y está altamente expuesto a estrés oxidativo. Por ello, con la edad, el ADNmt va acumulando daño, siendo la disfunción mitocon- drial una de las primeras marcas del envejeci- miento celular (1). Para investigar las consecuencias del deterioro del sistema inmune con la edad, hemos adelantado la disfunción mitocondrial que ocurre normalmente en todos los tejidos durante el envejecimiento, exclusivamente en los linfocitos T. Para ello, hemos generado un modelo de ratón con una depleción del gen que codifica para el factor de transcrip- ción mitocondrial A ( Tfam ) exclusivamente en los linfocitos T. TFAM es una de las proteínas más importantes para la estabilidad, replicación y transcripción del ADNmt por lo que su depleción reduce el contenido de ADNmt, y de las 13 subuni- dades de la cadena de transporte de electrones allí codificadas generando un mal funcionamiento de la mitocondria (Figura 2). La depleción de TFAM en el modelo fue inducida empleando el sistema de recombinación Cre-loxP, a partir del cruce de ratones Tfam fl/fl generados en el laboratorio del Prof. N. G. Larsson, con ratones que poseen la recombi- nasa Cre bajo el promotor de CD4 (CD4Cre). Mediante esta estrategia, se consigue la deleción del gen en las primeras etapas de desarrollo de las células T, de manera que la expresión de Tfam está impedida tanto en linfocitos T CD4 + como CD8 + . Los ratones Tfam fl/fl CD4Cre se desarrollan con normalidad y tienen un número similar de linfocitos CD4 + y CD8 + en el bazo y en los ganglios linfáticos en comparación con los ratones control, DE S I NC RON I Z ANDO L A EDAD DE L S I S T EMA I NMUNE DE L A DE L R E S TO DE T E J I DO S Figura 2. TFAM controla los niveles de ADN mitocondrial. TFAM es una proteína codificada por el ADN nuclear pero que está implicada en la estabilidad, transcripción y replicación del ADN mitocondrial. Cuando se elimina TFAM se reduce la cantidad de ADNmt, lo que impide la expresión de las proteínas de la cadena de transporte de electrones codificadas en él, afectando negativamente al proceso de fosforilación oxidativa y producción de ATP mitocondrial. La importancia de estas proteínas para el proceso de fosforilación oxidativa provoca en las células con una deleción de Tfam, inducida empleando el sistema de recombinación Cre-LoxP, una severa disfunción mitocondrial.