Anales de la RANM

34 A N A L E S R A N M R E V I S T A F U N D A D A E N 1 8 7 9 IMPLEMENTACIÓN DE LA NGS EN EL DIAGNÓSTICO DE HEMOGLOBINOPATÍAS Ropero P, et al. An RANM. 2026;143(01): 33 - 47 INTRODUCCIÓN Las hemoglobinopatías constituyen el grupo más prevalente de enfermedades monogénicas a nivel mundial, con una distribución epidemioló- gica estrechamente ligada a patrones migratorios históricos y contemporáneos [1]. Estas enferme- dades incluyen, de forma predominante, los síndromes talasémicos —resultantes de una produc- ción insuficiente de cadenas globínicas alfa o beta— y las variantes estructurales de hemoglobina, como HbS, HbC, HbE o variantes ultra raras con impacto variable en la estabilidad de la proteína [2]. En Europa y, de manera destacada, en países con alta diversidad demográfica, el diagnóstico de hemoglobinopatías ha pasado de ser una tarea relativamente estandarizada a un desafío clínico creciente. La amplia variabilidad fenotípica, las combinaciones genéticas complejas (como la doble heterocigosis α/β) y la existencia de variantes silenciosas o moduladoras hacen que las técnicas tradicionales ( High-Performance Liquid Chromato- graphy HPLC , electroforesis capilar, PCR dirigida, Multiplex Ligation-dependent Probe Amplification MLPA) resulten insuficientes para detectar con precisión todas las alteraciones relevantes [3]. La irrupción de la secuenciación masiva ( Next-Generation Sequencing NGS) ha supuesto un cambio paradigmático. Esta tecnología permite analizar simultáneamente múltiples genes relacionados con la síntesis y regulación de la hemoglobina —incluyendo regiones codifi- cantes, intrónicas profundas y elementos regula- dores—, aumentando drásticamente la capacidad diagnóstica frente a los métodos convencionales [4]. Además, facilita la identificación de variantes raras o combinadas, así como variantes de signifi- cado incierto (VUS), que con métodos tradicio- nales permanecerían sin diagnosticar [5]. En este contexto, la implementación de NGS en el laboratorio permite: a) aumentar la sensibilidad del diagnóstico molecular; b) reducir falsos negativos relacionados con deleciones complejas; c) resolver discordancias entre parámetros hematológicos y electroforéticos; d) mejorar la capacidad predic- tiva sobre la expresión fenotípica; y e) optimizar el consejo genético y las intervenciones clínicas [6]. El presente estudio describe la experiencia del laboratorio de referencia en este tipo de patolo- gías del Hospital Clínico San Carlos de Madrid, en la que se analizaron 1.200 pacientes mediante un panel NGS dirigido a HBA1 , HBA2 , HBB , HBD , HBG1 y HBG2 . Los objetivos principales fueron: 1) describir la prevalencia de variantes en genes globínicos; 2) evaluar el rendimiento clínico y diagnóstico de la NGS comparado con la práctica convencional; 3) analizar la correlación entre el genotipo y el fenotipo hematológico; y 4) presentar la casuística anual completa, como reflejo de la actividad de un centro de referencia nacional para hemoglobino- patías. Este estudio constituye uno de los análisis molecu- lares más amplios realizados en España mediante NGS, integrando una cohorte altamente diversa que permite abordar la complejidad real de las hemoglobinopatías en nuestro entorno. MATERIAL Y MÉTODOS El estudio se diseñó como un análisis observa- cional, descriptivo y retrospectivo que incluyó a 1.200 pacientes consecutivos remitidos a nuestro laboratorio para el diagnóstico de hemoglobi- nopatías durante el periodo comprendido entre octubre de 2024 y noviembre de 2025. Este tipo de diseño es ampliamente utilizado en estudios de caracterización molecular de hemoglobinopatías en cohortes clínicas reales [7]. La población estudiada reflejó la diversidad demográfica del área sanitaria y de los centros remitentes, que abarcan hospitales generales, unidades de pediatría, consultas de hematología clínica y programas de cribado familiar y neonatal. Se incluyeron tanto pacientes con sospecha clínica de talasemia o variante estructural como casos en los que las alteraciones hematológicas o electrofo- réticas generaban dudas diagnósticas. Los princi- pales motivos de derivación incluyeron: microci- tosis o anemia no explicada en estudio rutinario, fenotipo hematológico discordante (por ejemplo, HbA₂ en límite bajo o elevado sin mutación identi- HBA1/HBA2 (31.6%). Multigenic combinations were detected in 13.3% of cases, predominantly involving alpha and beta globin genes, with significant phenotypic modulation. NGS enabled the detection of rare structural variants, large deletions, delta-globin and gamma-globin alterations, and resolved numerous genotype– phenotype discrepancies, leading to correction of preliminary diagnoses based on conventional techniques. Conclusions: Multigene NGS significantly enhances diagnostic accuracy in hemoglobinopathies, particularly in demographically diverse populations. Its ability to identify complex genetic configurations and modulatory variants supports its integration into routine diagnostic workflows, improving clinical interpretation, genetic counseling, and patient management.